RIBI test

Od RIBI test je mikroskopski kromosomski test pri prenatalni in karcinomski diagnozi raka dojke, želodca in kronične limfocitne levkemije. Test, katerega rezultat je na voljo v 1 do 2 dneh, lahko v prvi vrsti zazna kromosomske nepravilnosti, ki jih je mogoče zaslediti do spremenjenega niza kromosomov v določenih kromosomih. Preizkus se izvede le kot spremljevalni ali predhodni test za podrobno analizo kromosomov, katerih rezultati so na voljo le 2 do 3 tedne po odstranitvi celic.

Kaj je FISH test?

Test, katerega rezultat je na voljo v 1 do 2 dneh, lahko v prvi vrsti zazna kromosomske nepravilnosti, ki jih je mogoče zaslediti do spremenjenega niza kromosomov v določenih kromosomih.

Test FISH (Fluorescenca in situ hibridizacija) v prenatalni diagnostiki omogoča sklep o spremenjenem naboru kromosomov za določene kromosome. Za izvedbo testa FISH je potrebno vsaj 50 nekultiviranih plodovih celic (amnionske celice), ki jih odvzamemo iz amnijske tekočine (približno 2 - 3 ml). Alternativna metoda za pridobitev primernih celic je vzorčenje horionskega villusa, pri katerem se celice odvzamejo iz območja pritrditve popkovnice z biopsijo.

Poseben postopek omogoča, da se posamezni prameni kromosomov 13, 18, 21 in kromosomi X in Y razlikujejo s fluorescentnimi barvami, tako da je možna trisomija opazna s prisotnostjo treh namesto dveh homolognih pramenov kromosoma . Pri raku želodca in dojke lahko s testom FISH preverimo, ali ima tumor več kot dve kopiji gena HER2 / neu (receptor za človeški epidermalni rastni faktor), kar ima posledice za vrsto kemoterapije. V primerih kronične limfocitne levkemije se lahko najpogostejši premiki kromosomov v določenih genih določijo z več analizami FISH testov v vzorcih iz kostnega mozga in periferne krvi, kar vpliva tudi na terapijo.

Funkcija, učinek in cilji

Kromosomi v izoliranih celičnih jedrih so narejeni tako, da razdelijo svojo dvojno vijačno strukturo s posebno kemično obdelavo ali z delovanjem toplote, kromosomske specifične DNK-sonde z ustreznim komplementarnim zaporedjem DNK pa se povežejo s "njihovimi" specifičnimi kromosomi. DNK sonde so označene z različnimi barvnimi fluorescentnimi barvami, tako da se označeni kromosomi med seboj ločijo s posebno programsko opremo in štejejo v avtomatiziranem postopku.

So znani z. B. Trisomije, pri katerih namesto dveh kromosomskih pramenov obstajajo trije za en kromosom, znane so tudi tako imenovane monomomije, pri katerih je samo en sklop kromosoma X in tri ali štirje homologni prameni vseh kromosomov. Najpomembnejše kromosomske spremembe, ki jih lahko zaznamo s FISH testom v prenatalni diagnozi, so Ullrich Turnerjev sindrom (monosomija X), sindrom trojnega X (trisomija ali polisomija X), Klinefelterjev sindrom, pri katerem se v vseh ali nekatere somatske celice pri dečkih imajo dodaten X kromosom (XXY namesto XY), Downov sindrom (trisomija 21), Edwardsov sindrom (trisomija 18) in Patau sindrom (trisomija 13).

Monosomija X, pri kateri imajo dekleta samo en kromosom X, je običajno usodna, kar pomeni, da v približno 98% primerov v prvih treh mesecih nosečnosti privede do splava. V primeru, da se porod tako ali tako pojavi, imajo dekleta normalno življenjsko dobo, so povprečne inteligence, vendar pogosto trpijo zaradi številnih okvar notranjih organov in so običajno sterilne. Sindrom trojnega X s kromosomskim setom XXX) prizadene samo dekleta. Možna je običajna nosečnost in porod.

Večinoma visoke ženske s trojnim X kromosomom lahko živijo normalno in ponavadi ne kažejo nobenih fizičnih nepravilnosti, kljub temu pa težave pri učenju niso redke in se pojavijo težave z lepimi motoričnimi sposobnostmi. Klinefelterjev sindrom, ki lahko prizadene le fante in moške, je značilen dodaten X kromosom, ki je prisoten v vseh celicah telesa ali le delno. Fizične lastnosti so nadpovprečne višine z nenavadno dolgimi rokami in nogami. Klinefelterjev sindrom običajno vodi do zmanjšane rasti testisov z zmanjšanim sproščanjem testosterona.

Downov sindrom, sinonim za trisomijo 21, je večinoma povezan z določenimi fizičnimi lastnostmi in s kognitivnimi okvarami. Obstajajo različne oblike trisomije 21, med katerimi približno 95% primerov prevladuje tako imenovana prosta trisomija 21. Trisomija 18 (Edwardsov sindrom) v večini primerov povzroči splav, povezana je z različnimi fizičnimi lastnostmi, življenjska doba pa je le nekaj dni. Za trisomijo 13 (Pätau sindrom) je značilno tudi veliko fizičnih lastnosti in nezaželeni razvoj, ki pogosto vodi do splavov ali mrtvorojenosti. Pričakovana življenjska doba otrok na termin je le nekaj let.

Cilj predporodnega testa FISH je odkriti znane kromosomske nepravilnosti v zgodnji fazi, da bi staršem ponudili alternativo zakonitega splava, s katerim bi otroka lahko prestavili na porod. Pri raku dojk in jeter lahko karcinom preverimo glede povečanega števila gena HER2 / neu z uporabo FISH testa. V pozitivnem primeru pride do povečane tvorbe receptorjev rastnega faktorja, ki se odzivajo na določene kemoterapije. Na voljo so tudi testi FISH za odkrivanje specifičnih genetskih nepravilnosti pri kronični limfocitni levkemiji (CLL), ki izboljšujejo sestavo učinkovitih zdravil za kemoterapijo.

Tveganja, neželeni učinki in nevarnosti

Sam test FISH ni povezan z nobenimi tveganji in nevarnostmi. Le ekstrakcija celic, ki jih je treba pregledati z biopsijo ali z vzorčenjem amnijske tekočine (amniocenteza), je povezana z rahlim tveganjem za okužbo zaradi svojega invazivnega značaja. Posebnost je, da test FISH lahko odkrije nekatere specifične kromosomske okvare, vendar ni mogoče zagotoviti, da kromosomske aberacije v primeru negativnega rezultata ne morejo biti, saj s FISH testom ni mogoče zaznati vseh nepravilnosti. V primeru pozitivnega rezultata preskusa je treba slediti nadaljnjim diagnostičnim postopkom, da bi rezultat potrdili ali ga zavrnili kot napačnega.